Procedūra Kumbso testas

Procedūra

Jei atliekamas tiesioginis Kumbso testas, raudona kraujas ląstelės filtruojamos iš paciento kraujo. Reikia patikrinti, ar jų yra antikūnai IgG tipo ant jų, sukeliančios hemolizinę anemiją arba kraujas grupės nesuderinamumas kūne. Kumbso serume yra antikūnai prieš žmogaus IgG antikūnus.

Mišinys kaitinamas (inkubuojamas) ilgiau. Jei jie yra antikūnai ant raudonos kraujas ląstelių, jos susikaupia ir testas bus teigiamas. Netiesioginį Kumbso testą sudaro dvi dalys.

Tikslas yra nustatyti laisvai kraujyje esančius antikūnus, nesusijusius su kraujo ląstelėmis. Šį kartą skysta dalis (serumas) filtruojama iš paciento kraujo. Pirmiausia tyrimui į serumą pridedama raudonųjų kraujo kūnelių.

Jei serume yra laisvųjų antikūnų, šie jungiasi prie raudonųjų kraujo kūnelių. Šios reakcijos nematyti. Tik antrame etape, kaip ir atliekant tiesioginį Kumbso testą, pridedamas ir pašildomas Kumbso serumas su antikūnais prieš žmogaus antikūnus. Jei rezultatas teigiamas, tirpalas taip pat agliutinuojasi.

Vertinimas

Kai antikūnai derinami su atitinkančiu Cooms serumu, serumo antikūnai (skysta kraujo dalis) jungiasi su paciento antikūnais. Antikūnai turi Y formos struktūrą, o tai reiškia, kad jie visada gali surišti du surišančius partnerius ir taip susieti raudonus kraujo kūnelius. Tai lemia didelį kraujo ląstelių kaupimąsi.

Šie grumstai tampa matomi - kraujas agliutinuojasi (kaupiasi) ir testas yra teigiamas. Jei pacientas neturi antikūnų, serumas lieka skystas. Jokių pokyčių nematyti - testas neigiamas.

Kokios yra alternatyvos?

Alternatyva Kumbso testas yra imunologinė ELISA procedūra (su fermentu susijęs imunosorbento tyrimas), kai tam tikri antikūnai yra pažymėti fermentu. Šis antikūnas pridedamas prie tiriamojo tirpalo. Jei pažymėti antikūnai reaguoja su tiriamojo tirpalo antikūnais, surištas fermentas suaktyvėja ir gamina dažus.

Atitinkami mėgintuvėliai keičia spalvą - testas teigiamas. Be ELISA procedūros, taip pat yra WESTERN-Blot, kuris dažnai naudojamas kaip patvirtinamasis teigiamos ELISA testas.