Eritrocitų morfologija, fazių kontrasto mikroskopija

Fazinė kontrastinė mikroskopija yra diagnostinė procedūra, naudojama urologijoje ir nefrologijoje (inkstų tyrimas) tiriant ir vertinant gyvybiškai svarbius citomorfologinius mėginius (mėginį su gyvomis ląstelėmis) hematurijoje ir šlapimo nuosėdų diagnostikoje. Nepakankama šio metodo svarba visų pirma grindžiama galimybe, susijusia su diagnostika, įvertinti eritrocitų morfologiją (raudonos kraujas ląstelių), kurie gali suteikti vertingos informacijos apie galimos hematurijos (kraujo šlapime) arba eritrociturijos (raudonųjų kraujo kūnelių šlapime) kilmę. Fazinė kontrastinė mikroskopija šlapimo nuosėdų yra idealus įvairių formų įvertinimui eritrocitai.Įvadas fazinė kontrastinė mikroskopija į įprastinę diagnostiką galima vertinti kaip didelį progresą, nes taip lengviau atskirti patognomoninius šlapimo komponentus nuo nepatologinių artefaktų. Fazių kontrastinė mikroskopija yra geresnė už šviesaus lauko mikroskopiją, kuri buvo naudojama iki fazinės kontrastinės mikroskopijos įvedimo, atsižvelgiant į artefaktų diferenciaciją. Jei yra neaiški ar neaiški išvada, pasinaudojus šia procedūra, galima sutaupyti mažiau naudingų priemonių, tokių kaip radiologinė ar cistoskopinė diagnostika (cistoskopija) dėl glomerulų hematurijos (žr. Toliau), taip sumažinant išlaidas ir sutaupant gydymo laiką.

Indikacijos (taikymo sritys)

Fazės-kontrasto mikroskopija naudojama urologijoje ir nefrologijoje tiriant eritrocitų morfologiją:

• Citomorfologinių gyvybiškai svarbių mėginių įvertinimas nustatant hematuriją ir šlapimo nuosėdų diagnozę. Indikacija:> 6-8 eritrocitai/ l nustatoma šlapime arba teigiamo ruoželio teste. Eritrocitų morfologijos kontekste glomerulų hematurijos diferenciacija nuo ne inkstų eritrociturijos atliekama nustatant dismorfinę (glomerulinę) ir eumorfinę eritrocitai.
• Glomerulinės kilmės dismorfinė hematurija nustatoma pacientams, sergantiems membraninėmis ir membranoproliferacinis glomerulonefritas, taip pat IgA nefropatija, židininė ir segmentinė nefrosklerozė bei vilkligės nefritas. Esant glomerulų hematurijai, eritrocitai verčiami per pažeistas glomerulų kapiliarų pamatines membranas, padarydami žalą. Mikroskopiškai atpažįstami dismorfiniai eritrocitai, kurie dar vadinami akantocitais (= eritrocitai su „Mikio pelės ausimis“).
• Eumorfinė hematurija (postglomerulinė hematurija) nustatoma pacientams, sergantiems inkstų cistos įtrūkus į tuščiavidurę sistemą, pūslė bilharzija, kraujas priemaiša iš makšties, sužalojimas įdėjus a šlapimo pūslės kateteris, kraujas krešėjimo sutrikimai ir kt.

Procedūra

Fazės kontrastinės mikroskopijos principas yra pagrįstas šviesos spindulių trukdžiais mikroskopo pluošto kelyje, kuris gali pasiekti didelio kontrasto nepieštų ląstelių vaizdą. Fazinio kontrasto mikroskopo struktūra ir funkcija:

• Žiedinė diafragma, kondensatorius, žiedinė fazių plokštelė ir objektyvas yra ypač svarbūs fazinio kontrasto mikroskopo funkcijai. Įterpiant žiedinę angą į kondensatorių, o fazinę plokštelę į objektyvą, atsiranda nedifraktuotų ir difrakuotų šviesos spindulių atskyrimas. Dėl to atsirandantis difrakuotų šviesos spindulių bangos ilgis sukelia fazių skirtumą, dėl kurio tiriamo mikroskopinio objekto struktūrinės detalės optiškai atrodo tamsesnės nei aplinkinė terpė. Fiziškai fazė trombocitai konvertuoti fazės ar kelio skirtumus į amplitudės skirtumus. Dėl šių amplitudės skirtumų objekto vaizdas atsiranda mikroskope, abipusiai panaikinant ar sustiprinant tiesioginius šviesos spindulius, praeinančius per objektą ir diferencijuojamus ties objektu.
• Taigi šio principo trūkumas yra tas, kad idealūs fazių paruošimai nėra taisyklė, nes amplitudės efektai paprastai būna ant fazių efektų.
• Remiantis struktūrų vaizdavimo pagal amplitudės skirtumus principu, esamos ląstelių struktūros vaizduojamos kaip graduoti pilkos spalvos atspalviai, priklausomai nuo jų optinių Tankis. Siekiant pagerinti konstrukcijų reprodukciją, plonų preparatų ir fazių naudojimą trombocitai yra nurodytas. Priklausomai nuo įvairaus etapo pobūdžio trombocitai, galima pasiekti tiek teigiamų, tiek neigiamų fazių kontrastų, todėl dominantys objektai bus rodomi tamsesni arba ryškesni nei jų aplinka.
• Atliekant fazinę kontrastinę mikroskopiją, dar svarbu tai pažymėti nekrozė (ląstelių mirtis) gali įvykti gana greitai dėl šviesos poveikio ir papildomų gyvybiškai svarbių ląstelių pažeidimų. Dėl šio greito nekrozė Norint išlaikyti plokštes, skaidrių vertinimas turi būti atliktas per vieną ar dvi valandas galiojimas diagnostikos priemonės. Taigi šiam gyvybiškai svarbių egzempliorių įvertinimo laiko apribojimui paprastai reikia dokumentacijos fotomikrografijos būdu arba, jei reikia, atliekant mikrokinematografiją. Fotomikrografas yra mikroskopinio vaizdo nuotrauka, padaryta su kamera, pritvirtinta prie mikroskopo. Naudojant mikrokinematografiją, yra galimybė užfiksuoti objektus, kuriuos mikroskopu stebi judantys vaizdai.