Fluorescencijos in situ hibridizacija (FISH) yra genetinis atrankos metodas DNR aptikti (Deoksiribonukleorūgštis) atskirų ląstelių branduoliuose.
Šis metodas apima specifinių DNR zondų naudojimą, kurie gali suteikti informacijos tik apie genomo regionus, kuriems naudojamas zondas yra specifinis.
Indikacijos (taikymo sritys)
- Skaitinės chromosomų aberacijos įtarimas:
- Skaitinių chromosomų anomalijų nustatymas (pvz., 21 trisomija).
- Norint nustatyti chromosomų nukrypimų mozaikas (pvz., UlrichoTurnerio sindromas).
- Mikrodeletelių nustatymas (pvz., Monosomija 22q11.2).
- Chromosomų nukrypimų nustatymas (pvz., lėtinė limfoleukemija (CLL), ne Hodžkino limfoma).
Minėtos indikacijos analizuojamos tarpfazėmis FISH (išsamesnės informacijos ieškokite „Laboratorijos procedūra“).
Procedūra
Reikalinga medžiaga
- Heparino kraujas (mažiausiai 1-2 ml)
Paciento paruošimas
- Nereikalinga
Trikdantys veiksniai
- Nežinoma
Laboratorinis metodas
Fluorescencijos in situ hibridizacija (FISH) apima fluorescenciškai pažymėtų DNR zondų (FISH zondų) naudojimą. Jie gali prisijungti prie specifinės DNR vietos chromosomoje, kuri vadinama hibridizacija. Prijungus arba po fluorescenciniu būdu pažymėto zondo įvertinimą galima atlikti naudojant mikroskopą. Šiame procese nustatomas fluorescencijos signalų skaičius tarpfaziuose branduoliuose. Be to, įvertinama vieta (pvz., Perkėlimas / vietos perkėlimas / į kitą chromosomą) metafazėje chromosomų yra įmanoma.
Kai skiriasi fluorescuojančios dažai yra naudojami skirtingoms tikslinėms DNR FISH procedūroje, tai vadinama daugiaspalviu FISH. Tai leidžia visiškai vizualizuoti genomą.
Kai kuriais atvejais DNR zondas nėra tiesiogiai pažymėtas fluorescuojančiais dažais, kurie vadinami netiesiogine procedūra. Vietoj to jis pažymėtas tokiomis medžiagomis kaip biotinas arba digoksigeninas. Šis metodas laikomas sudėtingesniu, bet jautresniu.
