Imunelektroforezė naudojamas laboratoriniam diagnostiniam monokloninio nustatymui antikūnai paciento kraujas. Monokloninis antikūnai yra gaunami iš tos pačios ląstelės ir yra nukreipti prieš tuos pačius antigenus. Dėl šios priežasties jie laikomi patologiniais ir, nustačius, rodo tokias ligas kaip Waldenström liga.
Kas yra imunoelektroforezė?
Imunelektroforezė naudojamas laboratoriniam diagnostiniam monokloninio nustatymui antikūnai paciento kraujas. Jonai turi skirtingą mobilumą. Šis diferencinis mobilumas yra elektroferezės metodų pagrindas. Šie metodai, naudojant elektrinius laukus ir gravitaciją, atskiria skirtingas medžiagas. Vienas iš šios srities gerai žinomas metodas yra imunoelektroferezė. Tai yra kokybinė diagnostinė procedūra, naudojama aptikti monokloniniai antikūnai. Antikūnai yra imunologiškai aktyvios baltymai iš specifinės ląstelių linijos. Monokloniniai antikūnai visi yra kilę iš to paties B limfocito ir atitinkamai nukreipti prieš vieną epitopą. Bet koks natūralus imuninis atsakas prieš įsiveržiančius antigenus atitinka polikloninį atsaką ir yra nukreiptas prieš skirtingus epitopus. Todėl monokloninis imuninis atsakas rodo patologinius kūno procesus. Monokloniniai antikūnai surišti skirtingai molekulės su dideliu specifiškumu. Šį rišimą galima nustatyti imunoelektroforezė. Metodas yra kokybinė laboratorinė diagnostinė procedūra, kurią sudaro dviejų tipų procedūros: serumo elektroforezė ir imunodifuzija.
Funkcija, poveikis ir tikslai
Imunelektroforezė sujungia serumo elektroforezės metodiką su imunodifuzija. Paciento serumas dedamas ant agarozės gelio arba celiuliozės acetato plėvelės. Taip pat naudojamas kontrolinis serumas. Po to mėginiai atskiriami elektroforetiniu būdu. Antiserumai, IgG, IgA, IgM, acto rūgštis normaliai elektroforezei ir kappa, o lambda yra taikomi tarp atskyrimo linijų. Tai sukuria reakciją su paciento serumo antikūnais, kurie sukuria kritulių linijas. Atsižvelgiant į naudojamą antiserumą ir atskirų linijų padėtį bei formą, galima padaryti išvadas apie imunoglobulinai su kapos arba lambda lengvomis grandinėmis. Lambda juostos atveju yra laisvų antikūnų grandinių. Naudojant retus IgE ir IgD, laboratorija pateikia papildomų įrodymų, leidžiančių tiksliai nustatyti imunoglobulinai. Imunodifuzinės elektroforezės procedūra vyksta pagal Pierre'ą Grabarą ir Curtisą Williamsą ir atitinka agarozės gelio elektroforezės derinį. baltymai ir antikūnų difuzija. Pirmiausia vyksta agarozės gelio elektroforezė. Vėliau esantys antikūnai difunduoja prieš antigenų juostas ir taip sukelia nuosėdas. Tai turėtų būti atskirta nuo Laurello „Rocket“ imunoelektroforezės, kuri atitinka baltymai agarozės gelyje, kurių kiekviename yra antikūnų koncentracija. Gelyje yra šiek tiek bazinis buferis, leidžiantis migruoti tik antigenams, stumiant didžiąją dalį antikūnų į izoelektrinį tašką veikiant šiek tiek baziniam pH, kol jie nustos judėti elektroforetiškai. Raketos imunoelektroforezės pradžioje yra antigeno perteklius, todėl susidaro tirpių antigenų-antikūnų kompleksai. Elektroforezės metu tarp antigenų ir papildomų antikūnų įvyksta papildomas prisijungimas. Ekvivalentiškumo taške tokiu būdu susidaro imunoprecipitatai, panašūs į raketas panašias figūras, kurių aukštis proporcingas antigenui koncentracija. Norint įvertinti tyrimą, matuojamas nuosėdų aukštis.
Rizika, šalutinis poveikis ir pavojai
Monokloninių antikūnų nustatymas yra ypač svarbus diagnozuojant išsėtinę mielomą ir Waldenstromo ligą. Gautas aptikimas rodo piktybinę imuninių ląstelių degeneraciją. Daugybinė mieloma atitinka a Vėžys iš kaulų čiulpai būdingas piktybinis antikūnus gaminančių ląstelių dauginimasis plazmoje. Šios plazmos ląstelės gamina antikūnus ir jų fragmentus. Piktybinės plazmos ląstelės visada kilusios iš bendros kamieninių ląstelių ir todėl yra genetiškai tapačios. Jie gamina tik monokloninius antikūnus. Šios ligos piktybinis navikas gali atitikti ikivėžinę stadiją, tačiau taip pat gali pasiekti labai piktybinę stadiją, kuri be gydymo greitai būna mirtina. Ligos simptomai atsiranda dėl piktybinio ląstelių augimo arba dėl antikūnų ir antikūnų fragmentų. Dažniausi simptomai yra kaulų skausmas, kaulų tirpimas ir savaiminiai kaulų lūžiai. Kalcis lygiai kraujas dažnai būna pakilę. Be to, nenormalūs antikūnai dažnai patenka į audinius ir sukelia organų disfunkciją, kuri gali vadovauti į tokias apraiškas kaip inkstas nepakankamumas arba sutrikusi kraujotaka. Waldströmo liga taip pat yra piktybinė naviko liga. Tiksliau, tai yra piktybinis limfoma liga, kuri klasifikuojama kaip lėtai progresuojanti ir beveik besimptomėHodžkino limfoma. Daugeliu atvejų ligoje galima nustatyti nenormalias monokloninio IgM gamybą, atsirandančias dėl piktybinio limfoma ląstelių. Waldenströmo liga savo savybėmis yra labai panaši į išsėtinę mielomą, tačiau paprastai rodo palankesnę eigą. Dauguma pacientų, sergančių Waldenström liga, iki diagnozės dažniausiai būna besimptomiai. Kiti pacientai rodo ankstyvus simptomus, tokius kaip nespecifiniai nuovargis arba periferinės neuropatijos, atsirandančios dėl monokloninio IgM nusėdimo mielino apvalkalas. Netgi maži IgM kiekiai gali sukelti polineuropatija. Kitiems pacientams polineuropatija neatsiranda net esant aukštam lygiui. Be to, atsiranda nespecifinių simptomų, tokių kaip karščiavimas, nepageidaujamas svorio kritimasarba gali pasireikšti naktinis prakaitavimas. Kaulų skausmas taip pat būdinga. Dėl IgM perprodukcijos kraujas tampa hiperviskinis, todėl minėti simptomai gali būti siejami su hiperviskoziškumo sindromo simptomais. Tai kraujavimo polinkis daugeliu atvejų pasireiškia dažnai kraujavimas iš nosies, galvos skausmas, bendras negalavimas ar neryškus matymas ir akustiniai skundai. Norint nustatyti tokio tipo piktybinius navikus, imunoelektroferezė jau seniai tapo standartine diagnostine procedūra.
