Užšalusio pjūvio analizė Histologija

Užšalusio pjūvio analizė

Tai reikalinga, jei chirurgui reikia informacijos apie operacijos metu pašalintą audinį, kad galėtų nuspręsti dėl procedūros eigos. Pavyzdžiui, mažas piktybinis navikas pašalinamas iš inkstas. Dabar reikia greitai įpjauti, kad sužinotumėte, ar navikas buvo visiškai pašalintas, ar audinių mėginių kraštuose vis dar yra daugybė piktybinių audinių.

Galų gale, užšalusio skyriaus tyrimo rezultatas nustato operacijos eigą ir tolesnį paciento terapijos planą. Kaip veikia įšaldyto skyriaus egzaminas? Per 10 minučių audinys stabilizuojamas užšaldant -20 ° C temperatūroje, tada 5 - 10 μm storio pjūvis padaromas vadinamuoju mikrotomu. Tai dedama ant skaidrių, mažos stiklinės plokštelės ir greitai nudažoma. Pabaigoje radiniai tiriami mikroskopu ir rezultatą galima nedelsiant perduoti operacinei.

Dažymo metodai

Per pastaruosius 120 metų sukurta daug histologinio dažymo metodų. Ląstelių struktūros ir audiniai yra suskirstyti į bazofilines, acidofilines ir neutrofilines ląsteles, atsižvelgiant į spalvų reakciją su dažomosiomis medžiagomis. Be to, taip pat yra smegrofilinės ir nukleofilinės struktūros.

Bazofiliniai dažai viską, kas turi rūgšties grupę ir yra dažomi baziniais dažais (pavyzdžiui, hematoksilinu arba metileno mėlynuoju). Acidofilinės struktūros yra bazinės, todėl gali būti nudažytos erozija arba rūgščiuoju fuksinu (rūgščiaisiais dažais). Tai apima citoplazmą ir Kolageno pluoštai.

Neutrofiliniai ar lipofiliniai komponentai negali reaguoti nei su rūgštiniais, nei su baziniais dažais, todėl jų negalima nudažyti. Agyrofiliniai komponentai gali surišti sidabro jonus ir paversti juos elementariaisiais sidabrais. Nukleofilinė (branduolys = ląstelės branduolys, mėgstanti ląstelių branduolį) spalvų reakcija atsiranda dėl nukleofilinių dažų ląstelės branduolys. Tai yra DNR jungiančios arba pagrindinės medžiagos, jungiančios nukleorūgštis.

Šiandien gerai išbandyti cheminio dažymo metodai buvo papildyti imunologiniais metodais. Antigeno ir antikūno reakcija naudojama šiame metode tam tikroms ląstelių savybėms nustatyti. Tada reakcija gali būti matoma sudėtinga technika.

Dažniausiai naudojami dažymo būdai: HE dažymas = dažymas hematoksilinu ir eozinu: natūralus hematoksilinas dažo visas struktūras mėlynai, kurios yra bazofilinės (= mėgsta bazę) ir todėl rūgščios, tokios kaip DNR, ląstelių branduoliai, ribosomosKita vertus, eozinas gaminamas sintetiniu būdu. Eozinas visas ląstelių struktūras nudažo raudonai, jei jos yra acidofiliškos (= mėgsta rūgštį) arba bazinės.

Šios baltymai citoplazmos, mitochondrijosir Kolageno yra tarp jų. Azano dažymas: jį sudaro pirmosios abiejų spalvų raidės - azokarminas G ir anilinas, mėlynai auksinis oranžinis: ląstelės branduolys raumenų skaidulos yra raudonos, o citoplazma yra rausva. Kolagenas o tinklinės skaidulos tampa mėlynos.

Dažyti naudojama „Giemsa“ dėmė („Giemsa“ Azure-Eosin-Methylene Blue) kraujas ląstelių tepinėliai. Ląstelių branduolius galima lengvai atpažinti iš purpurinės spalvos reakcijos. Citoplazmos dėmės melsvos.

Dažant elastika (rezorcinolis-fuksinas-orceinas), visi elastiniai pluoštai yra juodai violetiniai. Van Giesono dažymo metodas būdingas tuo, kad pirmiausia dažymas atliekamas hematoksilinu. Tada naudojamas piko rūgšties fuksinas (mikro fuksinas) arba piko rūgšties tiazinas.

Galų gale ląstelių branduoliai atrodo juodai tamsiai rudi, citoplazma atrodo gana šviesiai ruda. Kontrastingumas pikrino rūgštimi tiazinu nudažo elastines skaidulas ir raumenų audinius oranžinės geltonos, o kolageno skaidulos - raudonai. Dažant trichromu pagal Masson-Goldner, dažymo metodo dydis yra svarbiausias faktorius.

Naudojamas geležies hematoksilinas, paprastai su trimis papildomais dažais, būtent rūgštinė lapė, oranžinė G ir šviesiai žalia. Ji dažo kolageną jungiamasis audinys ir gleivės žalios, ląstelių branduoliai mėlynai juodi, citoplazma raudona, raumenys šviesiai raudoni ir raudoni kraujas langeliai (eritrocitai) oranžinė-raudona. Be to, yra Gramo dažymas, kuris padeda atskirti bakterijos.

Gramteigiamas bakterijos yra nudažytos mėlynai, o gramneigiamos bakterijos - raudonai. Taip pat naudojamas Ziehl-Neelsen dažymas bakterijos, būtent tie, kurie atsparūs rūgštims ir, pavyzdžiui, rodo tuberkuliozė patogenai raudonai. Kiti dažymo metodai, kuriuos reikėtų paminėti, yra „Berlin-Blue“ reakcija, atsakinga už trivalentių geležies jonų aptikimą audinių skyriuose, ir geležies hematoksilino dažymo metodas pagal Heidenhainą.