ELISA testas yra laboratorinis medicininis tyrimas, kurio metu atliekama vadinamoji antigeno-antikūno reakcija. Galima tirti skirtingus antigenus, kurie vaidina svarbų vaidmenį žmogaus ar veterinarijoje. Vokietijoje bandymą atlikti pavedama tik akredituotoms laboratorijoms.
Kas yra procedūra?
Laboratorinių medicininių tyrimų metu ELISA tyrimas priklauso vadinamosioms imunologinėms procedūroms. Atliekant bandymo procedūrą, baltymai molekulės galima aptikti gana skirtinguose kūno skysčiai. ELISA yra sutrumpintas fermentų susietų imuninių sorbentų tyrimas. Todėl tai yra anglų kalbos pavadinimas, kuris vis dėlto įsigalėjo vokiečių medicinoje. ELISA testas priklauso vadinamosioms imunologinėms procedūroms atliekant laboratorinius medicininius tyrimus. Tyrimo procedūra gali būti naudojama baltymams aptikti molekulės pačių įvairiausių kūno skysčiai. Šių aptikimas molekulės savo ruožtu leidžia daryti išvadas apie tam tikras ligas ar klinikinius vaizdus, todėl gydytojai savo diagnozę taip pat nustato priklausomai nuo tokio ELISA testo rezultato. Todėl testo procedūra yra labai svarbi kasdienėje klinikinėje praktikoje, nesvarbu, ar ambulatoriškai, ar stacionare. Atitinkamas kūno skysčiai, pavyzdžiui, sveikas kraujas ar skysčių iš sąnarių, iškart po surinkimo iš paciento, siunčiami į laboratoriją. Paprastai tai yra gana skubūs mėginiai, nes vietinė medžiaga laikoma jautria ir turėtų būti kuo greičiau ištirta. Vadinamieji per daug saugomi mėginiai gali vadovauti į klaidingai neigiamus rezultatus, nes patologinis baltymai aptikti, tuo tarpu sumažėjo arba visiškai sunyko. Taigi vadinamieji preanalitikai tenka svarbus vaidmuo atliekant ELISA; įtartinus ar neigiamus rezultatus reikia pakartoti dar kartą, jei yra tinkamų klinikinių simptomų.
Funkcija, poveikis ir tikslai
Norint teisingai atlikti bandymus akredituotoje medicinos laboratorijoje, būtina naudoti mėgintuvėlius ir vadinamąsias mikrotitravimo plokšteles. Šios plokštelės su smulkiais pusiau įgaubtais įdubimais yra pagamintos iš specialaus plastiko ir kiekviena padengta labai specifiniu antikūnu. Jei aptinkamas antigenas yra tiriamame kūno skystyje, tai vadinamuoju užrakto ir rakto principu įvyksta specifinė antigeno ir antikūno reakcija. Mėginio medžiagą į plokšteles gali įkišti rankiniu būdu laboratorijos darbuotojai, naudodami pipetes, arba visiškai automatiškai. Šiuolaikiniuose laboratorijos medicinos institutuose ELISA diagnostikai naudojamos tik visiškai automatizuotos sistemos. Tačiau tai turi stebėti apmokytas personalas, medicinos techniniai laboratorijos padėjėjai. Už vadinamąją vidinę ir išorinę kokybės kontrolę taip pat atsako laboratorijos darbuotojai, pranašesni už medicinos personalą už laboratorinę mediciną, infekcinė liga epidemiologija ir mikrobiologija. Po pirmosios bandymo partijos, ty užpylus medžiagą ant plokštelių, specifiniai mėginyje esantys antigenai, jei jų yra, jau yra susirišę su antikūnai ant plastikinės plokštės. Tada atliekamas plovimas fiziologiniu fiziologiniu tirpalu, kad būtų pašalinti trikdantys veiksniai, tokie kaip nepageidaujami antigenai arba baltymai nuo preparato. Šis žingsnis yra labai svarbus, kad būtų išvengta klaidingų teigiamų reakcijų. Klaidingai teigiamas laboratorijos aiškinamas rezultatas gali sukelti mirtinas pasekmes pacientui. Antrame bandymo etape pridedamas dar vienas antikūnas, susietas su fermentu. Šis žymėtas antikūnas taip pat jungiasi su antigenu. Trečiajame ir paskutiniame etape pridedama apibrėžto kiekio specialių dažų, kurie didesniu ar mažesniu laipsniu suskaidomi vis dar esančių fermentų likučių. Skilti gali tik toks fermentas, kuris anksčiau nebuvo susijęs su antigenu kartu su antikūnu. Laisvas fermentas sugeba suskaidyti pridėtus dažus. Tikslų skeltų dažų kiekį galima tiksliai nustatyti kitu laboratoriniu metodu, vadinamąja fotometrija. Tai leidžia padaryti tikslias išvadas, ar antigeno apskritai yra mėginio medžiagoje, ir, jei taip, kiek. ELISA testas naudojamas ne tik pradinei diagnozei nustatyti ar įtariamoms tam tikrų ligų diagnozėms patvirtinti ir klinikinėms nuotraukoms, bet ir stebėti jų pažangą. Jei antigenas koncentracija bandymo metu tampa mažesnis terapija, terapija laikoma sėkminga.
Rizika, šalutinis poveikis ir pavojai
ELISA testas savo informacinę vertę įgyja pirmiausia nustatant antigenines struktūras kūno skysčiuose. Testas leidžia vadinamąjį kokybinį, tačiau taip pat pusiau kiekybinį ir kiekybinį teiginį apie įtariamą tam tikrų antigenų buvimą kūno skysčiuose. Visas kraujas tirti negalima, tik kraujo serumas. Tiesioginis paciento tyrimas, pavyzdžiui, iš kapiliaras kraujas iš piršto galiukas, todėl, kaip ir kai kurių kitų serologinių tyrimų metu, iki šiol neįmanoma. Žmonių medicinoje ELISA testas pirmiausia naudojamas bakterijų, virusų ar grybelių sukeltoms infekcijoms nustatyti. Be to, visi teigiami hepatito serologija dar kartą patikrinama naudojant ELISA testą kaip standartą. Tam tikras hormonai, pavyzdžiui, nėštumas hormoną HCG, taip pat galima nustatyti atliekant ELISA testą. Jei metu atsiranda tam tikrų komplikacijų nėštumas, tikslios žinios apie koncentracija nėštumo hormono kiekis kraujyje yra labai naudingas diagnostiškai ir terapiškai. Kita tyrimo nuoroda yra vadinamųjų paraproteinų aptikimas šlapime, nes jų būna, pavyzdžiui, įvairiuose naviko ligos, pvz., išsėtinė mieloma. ELISA testas ir šiandien atliekamas daugelyje laboratorijų, tačiau ekspertai mano, kad tai yra pasenę. Imuninė reakcija kartu su fermentai (enzimai) ELISA teste pastaraisiais metais buvo vis dažniau keičiamas radioaktyviai antikūnai, kurie suteikia dar geresnį kiekybinį matavimo rezultatą. Šie testai taip pat vadinami RIA, radijo imunabsorbento testu. Kiti specifiniai ELISA pasiekimai yra lengvi cheminiai metodai, tokie kaip liuminescencija ar fluorescencija.
